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磁珠全血基因DNA提取试剂盒操作和储存的注意事项
点击次数:354 发布时间:2017-12-09
磁珠全血基因DNA提取试剂盒根据全血特点采用几个快速步骤提取基因组DNA,首先红细胞裂解液裂解去除不含DNA的红细胞,细胞核裂解液裂解白细胞释放出基因组DNA,然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白,zui后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液,操作步骤简单,实验成本低,产量高,纯度好,适合各种下游实验。
磁珠全血基因DNA提取试剂盒产品特点:
1.从十几个配方中优选出的红细胞裂解液配方,裂解快速完全。
2.不需要使用有毒的苯酚等试剂。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在60分钟内完成。
4.结果稳定,产量高(典型的产量3ml全血可提取出50-150µg),OD260/OD280典型的比值达1.7——1.9,长度可达50Kb-150kb,可直接用于构建文库、PCR、Southern-blot和各种酶切反应。
磁珠全血基因DNA提取试剂盒注意事项:
1.所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到2500 x g, 4000rpm以上,并配备容纳15ml离心管转头的传统台式离心机。
2.如果实验室有50ml转头的台式或立式离心机,建议采用PP材质,可高温高压灭菌,50ml直口圆底离心管,不用拧螺旋盖,方便开盖,在本实验中,直口圆底离心管方便清洗,经过多次漂洗消毒灭菌,可重复使用,降低实验成本。
3.用户需自备异丙醇和70%乙醇。
4.典型的产量3ml全血可提取出50-150µg 基因组DNA(不同样品尤其疾病样品中白细胞数量差异可能非常大,因此产量的个体差异也可能非常大)。
5.溶液型全血基因组DNA提取方法,可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的全血量(100µl-20ml),需要具体产品操作说明,请索取不同处理量的操作手册。
6.磁珠全血基因DNA提取试剂盒可运用于多种抗凝剂的全血,如EDTA、柠檬酸、肝素抗凝血。其中由于肝素抗凝血的白细胞沉淀团很难打散重悬,影响裂解效果,建议选用非肝素的抗凝剂收集血液标本。
7.为了zui佳效果,zui好使用新鲜血液标本或者4℃存放小于3天的标本,不要使用反复冻融超过3次的标本,否则会严重降低产量。
磁珠全血基因DNA提取试剂盒适用于快速提取各种动物全血基因组DNA。
磁珠全血基因DNA提取试剂盒储存事项:
1.环境温度低时细胞核裂解液中某些去污剂成份会析出出现浑浊或者沉淀,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。
2.蛋白沉淀液可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,如果不能完全溶解,也不影响使用效果,直接取用上层溶液即可。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
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