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关于聚合酶的聚合作用有想知道的吗?
点击次数:51 发布时间:2021-09-17
 
  聚合酶又称多聚酶。是专门生物催化合成脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的一类酶的统称。1957年,美国科学家阿瑟·科恩伯格(ArthurKornberg)发现。可以识别修饰的NTP,例如生物素标记、高辛标记、荧光素标记的NTP,可以用于各种标记RNA的合成。同时对于T7启动子有高度的特异性。
  是一种高度特异识别T7启动子序列的DNA依赖的5'→3'RNA聚合酶。T7RNAPolymerase可以催化单链或双链DNAT7启动子下游NTP的掺入,合成与T7启动子下游的模板DNA互补的RNA。用于RNA合成,合成的RNA可以用于或用作:杂交探针,基因组DNA序列分析,核糖核酸酶保护测定(RNaseprotectionassay),反义RNA合成,作为体外翻译的RNA模板,RNA剪接研究的底物,RNA二级结构和RNA-蛋白质相互作用,核酸扩增分析,siRNA、miRNA等小RNA。
  聚合酶的聚合作用:
  在引物RNA'-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有催化作用。dNTP进入结合位点后,可能使酶的构象发生变化,促进3'-OH与5'-PO4结合生成磷酸二酯键。若是错误的核苷酸进入结合位点,则不能与模板配对,无法改变酶的构象而被3'-5'外切酶活性位点所识别并切除之。
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