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首页>产品中心>聚乙二醇衍生物>NEB内切酶>聚合酶 连接酶NEB内切酶
NEB内切酶

简要描述:

NEB可提供210多种内切酶,其中有130多种内切酶为重组酶。克隆及重组技术的运用,使NEB能在提高内切酶的纯度及品质的同时,极大地削减生产费用,从而为用户提供价格更合理、品质更优良的产品上海腾骞生物www.tqbio.net, ,

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NEB可提供210多种内切酶,其中有130多种内切酶为重组酶。克隆及重组技术的运用,使NEB能在提高内切酶的纯度及品质的同时,极大地削减生产费用,从而为用户提供价格更合理、品质更优良的产品

T4 DNA 连接酶

特性

■  高效连接粘性末端和平末端
■  T/A 克隆
■  dsDNA 切刻修复
■  构建高丰度克隆文库
■  RNA 和 DNA 的连接

概述

该酶催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的 5?-磷酸末端和 3?-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平齐末端或粘性末端之间的连接,还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻。

来源

纯化自 E. coli C600 pcl857 pPLc28 lig8。

反应条件

1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM MgCl2,10 mM DTT,1 mM ATP]。推荐 DNA 5? 末端浓度为 0.1-1.0 μM,16℃ 温育。
热失活:65℃ 10 分钟。

质保声明

T4 DNA 连接酶经过严格的质控检测,确保该产品具有zui高的活性和纯度。

单位定义(粘性末端活性单位)

1 单位指在 20 μl 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液中,16℃ 反应条件下,30 分钟能使 50% 的经 HindⅢ 消化的λDNA 片段 [ 5? 端浓度为 0.12 μM(300 μg/ml)] 连接所需的酶量。

浓度

400,000 units/ml 和 2,000,000 units/ml。

注意事项

与 E. coli DNA 连接酶需要 NAD+ 作辅因子不同,T4 DNA 连接酶的辅因子是 ATP。


稀释后的 T4 DNA 连接酶应于 -20℃、50% 甘油贮存缓冲液(稀释缓冲液 A,NEB #B8001)中保存。如稀释后马上使用,也可用 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液稀释。


只要在反应体系中补加 1 mM ATP,连接反应就可以在 NEB 提供的四种限制性内切酶缓冲液或在

T4 DNA 多聚核苷酸激酶反应缓冲液中进行。

 

金牌连接酶  
NEB#产品名称规格单价
M0202LT4 DNA Ligase100,000 units3,029
M0202MT4 DNA Ligase, high conc.100,000 units3,029
M0202ST4 DNA Ligase20,000 units699
M0202TT4 DNA Ligase, high conc.20,000 units699
M0202VT4 DNA Ligase10,000 units349
M2200LQuick Ligation Kit150 rxns4,569
M2200SQuick Ligation Kit30 rxns1,009
M2200VQuick Ligation Kit15 rxns509
M0367LBlunt/TA Ligase Master Mix250 rxns4,569
M0367SBlunt/TA Ligase Master Mix50 rxns1,149
M0370LInstant Sticky-end Ligase Master Mix250 rxns4,569
M0370SInstant Sticky-end Ligase Master Mix50 rxns1,149

 

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