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DNA提取试剂盒是如何从动物组织中提取基因组DNA的
点击次数:156 发布时间:2022-03-25
 
  DNA提取试剂盒是根据氯化芐法构建的,能够从样本中提取基因组DNA的试剂盒。氯苄具有能将含有纤维素等的细胞壁中的羟基苄基化,从而破坏细胞壁的特性。本制品利用了氯苄的这一特性,将植物样品冻结融解后,再使用PipetTip的端将植物样品在Microtube壁上数次按压即可破坏细胞壁。本法与传统方法相比,省去了液氮研磨等烦琐步骤,有利于一次性处理大量样品。而且,本制品经过了改良,热处理时间只需15分钟,使用本制品从实验开始至水相回收只需30分钟时间。得到的基因组DNA可以进行PCR扩增及限制酶处理等。
  DNA提取试剂盒如何从动物组织中提取基因组DNA:
  使用研钵进行匀浆时:
  ①取1~100mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的研钵中,快速用力展研成匀浆。
  注)下列组织请加液氮研磨至粉末状。
  A.富含DNA酶的胰脏、脾脏、胸腺、淋巴等组织。
  B.富含胶原蛋白的皮肤、肌腱等组织。
  C.富含角质蛋白的组织或坚硬的组织(如骨骼)等。
  ②加入650μl的SolutionA和0.9μl的RNaseA1,温和研磨30秒钟。
  注)使用上述①-注)的实验材料时,请在加入SolutionA及RNaseA1后,将研钵置于65℃水浴上研磨1分钟。
  ③收集650μl研磨好的组织匀浆液移至CollectionTube中。如果匀浆体积不足650μl,请补充SolutionA至650μl,65℃保温5分钟。
  使用研磨棒进行匀浆时:
  ①取1~100mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的CollectionTube中,用研磨棒快速研磨成糊状。
  ②加入350μl的SolutionA和0.9μl的RNaseA1后用研磨棒快速研磨成匀浆。
  ③加入350μl的SolutionA将研磨棒上的匀浆冲入CollectionTube中,充分振荡混合后,65℃保温5分钟。
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  • 张小姐

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